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如何避免PCR實驗室污染?
更新時間:2022-06-09 點擊量:
1786
如何避免PCR實驗室污染?
主要是在采(取)樣的過程中,由于取樣工具之間的交叉造成污染;或者在核酸提取的過程中,由于移液器、離心管等使用不當導致的污染。?
PCR試劑的污染
主要是在PCR試劑配制過程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。
克隆質粒的污染
在實驗室操作中經常會用到陽性參考品,這些陽性參考品大多數是由某些克隆質粒制作而成,克隆質粒在單位容積內濃度高,不小心使用極易造成污染。(如何避免以及處理PCR實驗室污染?)
PCR擴增產物污染
這是PCR反應中主要常見的污染問題。因為PCR產物拷貝量大,遠遠高于PCR檢測數個拷貝的極限,所以極微量的PCR產物污染,就可造成假陽性結果。還有一種容易忽視,可能造成PCR產物污染的形式是氣溶膠污染,在空氣與液體面摩擦時就可形成氣溶膠,據計算一個氣溶膠顆粒可含4.8萬拷貝,因而由其造成的污染是一個值得特別重視的問題。
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